Regresaron y rediseñaron su sistema Crispr, utilizando el mapa actualizado para mantener sus ediciones alejadas de genes esenciales. Luego intentaron nuevamente con embriones. Esta vez funcionó. Pero ahora era el verano de 2018; Habían pasado casi tres años. El proyecto estaba muy retrasado. Tuvieron que pedirle al USDA que renovara su beca. La larga serie de contratiempos hizo que Owen se sintiera bastante desanimado, deseando nunca haber probado su suerte con el ganado Crispring. Su reciente éxito en la edición de los embriones en una nueva ubicación del cromosoma X lo revivió, pero esa sensación fue de corta duración. El primer lote de embriones procesados ​​que transfirieron al útero de vaquillas de reemplazo potencial no tomó. Desde el siguiente lote, se implantaron cinco embriones y llegaron solo en las primeras etapas del embarazo. Estar perdido Unas pocas semanas después.

Owen y Van Eenennaam consultaron con criadores y veterinarios sobre lo que estaban haciendo mal. Sospechaban que los investigadores habían dañado los embriones en el laboratorio, tal vez durante la biopsia, cuando tomaron una pequeña muestra del embrión para secuenciarlo y determinar si la operación tuvo efecto. Esto lleva tiempo y requiere congelar los embriones hasta que los resultados vuelvan del laboratorio de secuenciación. Cada paso (congelación, biopsia, procesamiento) reduce la viabilidad del embrión.

Había una manera más fácil de hacerlo. Podrían reconfirmar ese gen productor de fluorescencia y emitir un destello de luz ultravioleta sobre los embriones. Un resplandor verde les diría que la operación había funcionado, no se necesita biopsia ni congelación. Pero eso haría que esos animales fueran transgénicos; GFP proviene de un tipo de medusa bioluminiscente que vive en las aguas del estado de Washington. Y eso los haría organismos genéticamente modificados o OGM, sujetos al arduo proceso de aprobación de la FDA. El objetivo general del proyecto y el uso de Crispr era evitar eso.

Sin embargo, el panorama regulatorio había cambiado mientras se habían remendado. En enero de 2017, la FDA decidió clasificar cada ADN animal procesado como si fuera un nuevo tipo de medicamento. Eso significaba que cualquier rebaño Crispr exclusivamente masculino estaría sujeto a las mismas regulaciones que los OMG de primera generación. Y si mover el ADN de la vaca a los ojos del FBI fue como agregar una medusa, el equipo pensó: ¿por qué no hacerles la vida un poco más fácil? Con pocas esperanzas de que los ganaderos o entidades comerciales interesadas en sus imitaciones de SRY fueran demasiado difíciles de meterse con el FBI, los investigadores también seguirían adelante con el gen brillante.

Una vez, Van Eenennaam y Owen intentaron mover el gen SRY junto con el gen brillante a aproximadamente 200 embriones. Como era su última grabación, decidieron no realizar la edición en el cromosoma X, como lo habían intentado, sino en un puerto seguro establecido en el cromosoma 17. Veintidós embriones sobrevivieron a este proceso, nueve de los cuales sobresalieron bajo los rayos UV. -ligero. Pero solo había un verde completamente brillante, dice Owen. Y un mes después de que todos los embriones fueron transferidos a las vaquillas, ese verde brillante fue el único embarazo que se quedó estancado. El equipo de investigación decidió nombrar al ternero en crecimiento Cosmo, después de un personaje verde brillante en la serie animada de televisión de Nickelodeon The Fairly OddParents, que se emitió a mediados de la década de 2000. «Claramente soy demasiado Boomer, porque nunca había oído hablar de eso», dice Van Eenennaam.

La ecografía sugirió que Cosmo era un hombre. Y cuando nació el 7 de abril, eso fue lo segundo que el veterinario revisó después de asegurarse de que la pantorrilla respirara. «Sí, él tiene testículos, ¡dos de ellos!» les dijo a Van Eenennaam y Owen. «Hombre fenotípico, ¡es un buen comienzo!»



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